細胞小劇場第三話 Trypsin
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有些貼附細胞可以用培養基或是緩衝液體沖洗下來,但大部分需要用胰蛋白( trypsin)處理,Trypsin切斷胺基酸之間的鍵結,使貼附在培養基底部的細胞能分離,EDTA是金屬螯合劑抓住鈣、鎂離子進而增加Trypsin的作用
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#養細胞
#細胞小劇場
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請問利用貼盤方式洗去非kupffer cell,
culture 24hr 之後,
用D-PBS WASH
加入trypsin(?%) 作用?分鐘
加入含血清medium中合,
收集細胞做實驗。
我試過0.05% 1min--------------不動如山
我試過0.05% 2min--------------2-3成
我試過0.5% 1min--------------大約一半
我試過0.5% 2min--------------7成
請問有人有經驗嗎? 因為細包很少,沒有辦法一直試,
請有經驗的前輩告訴我,少走一些冤枉路,謝謝!!
ps我之前看文章有用到0.5%的1min,但周遭人都跟我說太膿,細胞會死,
我去染色看存活率是還可以,但不知會不會有其它影響。
我用corning 的dish。
不考慮用刮的,我需要完整的細胞。
謝謝各位的回答!
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