美容評論
白頭髮：你真係咁憎我？
無人會鐘意白髮的，因為白髮代表衰老
頭髮本身就是無色的。
每個毛囊都有黑色素細胞，當頭髮一邊生長時，黑色素細胞一邊分泌黑色素，便會把整條頭髮染成黑色。
為甚麼有白髮？是黑色素細胞受到氧化壓力而凋亡，頭髮生長時當沒有黑色素幫忙染色，那生出來的頭髮就是無色（白色）
所以，防白髮的方法，就是如何保護黑色素細胞，減少它因氧化壓力而凋亡。
產品是何首烏液
用法是每晚洗完頭，吹乾後，於頭皮塗它過夜，塗法是將幾滴何首烏液點在手指頭，之後捽均全頭皮便可
最後注意，外塗何首烏防止將來出現白髮，但對於已生出的白髮則無得改
Herb Pharm, He Shou Wu, Whole Root, 1 fl oz (30 ml)
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Ps.我絕對不憎古天樂，他是歷代楊過中我的最愛，沒有之一！
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he 染色方法 在 [求救] medaka冷凍切片及HE染色(已爬文過)(急) - 看板Biotech 的美食出口停車場
各位大大好
現在我在做 medaka 的冷凍切片 及 HE染色
(之後要繼續做 免疫染色、骨骼染色及細胞凋亡的染色)
但是卡在，切片一直都切不好，切片前處理條件一直試不出好的結果
(組織都會破損)(主要觀察腦和眼睛)
版上的方法有參考(畢竟sample不是medaka)網路的資料也參考過，但切出來就是都不好
以及HE染色，染色前和染色後，組織會有破損的情況，
有時切片甚至在染的時候切片會掉下來(只有一部分)
所以在此想問問各位大大，有沒有建議的切片前處理和HE染色的步驟，或是其他染色的步
驟
在下方我會列出我切片的處理方式和HE染色的步驟，
不知是否可以修正的地方
(本來想附上照片，但照片很多，有需要看照片的，可以提出，謝謝!)
先感謝大大!
一、切片前處理
1.
4% (paraformaldehyde)PFA + 30% sucrose，RT，8H，用Rocking shaker 30 rpm
用OCT包埋，直接放入 -80 ℃冰箱小於30分鐘後切片。
厚度10 um，溫度-15 ℃。
2.
4% PFA + 1X PBS + 5% sucrose + 33%OCT ， 4度C，1H →
4% PFA + 1X PBS + 10% sucrose + 33%OCT ， 4度C，1H →
4% PFA + 1X PBS + 30% sucrose + 33%OCT ， 4度C，O.N
用OCT包埋，直接放入 -80 ℃冰箱，2H後切片。
厚度10 um，溫度-15 ℃。
3.
5% sucrose ， 4度C，1H →
10% sucrose ， 4度C，1H →
20% sucrose ， 4度C，1H →
30% sucrose ， 4度C，1H
用試鏡紙將水分吸乾
用保鮮膜包住sample
放入 - 20度C 2H
放入 - 80度C 4H
將鋁座用OCT做一個平台，OCT變白後，再加入一點OCT，趁OCT未變白前，將sample放好並
擺好位置，再用OCT將SAMPLE完全包埋住，OCT變白後切片
厚度10 um，溫度-15 ℃。
4.
5% sucrose ， 4度C，1H →
10% sucrose ， 4度C，1H →
20% sucrose ， 4度C，1H →
30% sucrose ， 4度C，1H →
50% sucrose ， 4度C，3H →
用試鏡紙將水分吸乾
用保鮮膜包住sample
放入 - 20度C 2H
放入 - 80度C 4H
將鋁座用OCT做一個平台，OCT變白後，再加入一點OCT，趁OCT未變白前，將sample放好並
擺好位置，再用OCT將SAMPLE完全包埋住，OCT變白後切片
厚度10 um，溫度-15 ℃。
5.
5% sucrose ， 4度C，1H →
10% sucrose ， 4度C，1H →
20% sucrose ， 4度C，1H →
30% sucrose ， 4度C，1H →
50% sucrose ， 4度C，3H →
4% PFA ， 4度C，1H
用試鏡紙將水分吸乾
用保鮮膜包住sample
放入 - 20度C O.N
放入 - 80度C 2H
將鋁座用OCT做一個平台，OCT變白後，再加入一點OCT，趁OCT未變白前，將sample放好並
擺好位置，再用OCT將SAMPLE完全包埋住，OCT變白後切片
厚度10 um，溫度-15 ℃。
6.
5% sucrose ， 4度C，1H
10% sucrose ， 4度C，1H
20% sucrose ， 4度C，1H
30% sucrose ， 4度C，1H
50% sucrose + 4% PFA + 1X PBS + 33% OCT ， 4度C，3H
用試鏡紙將水分吸乾
用保鮮膜包住sample
放入 - 20度C O.N
放入 - 80度C 2H
將SAMPLE 取出，放入裝有OCT的TUBE蓋子中，擺好位置後，放入-15度C(切片機溫度)，變
白後切片
厚度10 um，溫度 -15℃
※切出來的切片直接用玻片貼片，全部切完後直接染色或放入4度C冰箱保存
--------以上是後期試過的方式，結果都不讓老師滿意，怎麼做可以更好呢?----------
※HE染色
將切好的切片從4度C冰箱取出並回溫
˙玻片用(冰醋酸 5ml +甲醇95ml) 固定30秒。
˙用DD water清洗玻片，將玻片稍微擦乾。
˙以Hematoxylin染5秒。
˙用DD water清洗玻片，將玻片稍微擦乾。
˙處理85% Alcohol 1分鐘。
˙再用Eosin 染5秒。
˙用DD water清洗玻片，將玻片稍微擦乾。
˙用95%、100% Alcohol各脫水1分鐘。
˙放入100% Xylene 10分鐘後封片(蓋玻片與Permount)。
這樣染色的步驟需要修改嗎?
第一個步驟 用(冰醋酸 5ml +甲醇95ml) 固定30秒
會掉片是因為這步驟的關係嗎?拉長時間會比較好嗎? (老師覺得不是這一步驟出問題)
問題很多~先感謝大大 提出一些建議~我已經測試了兩個月了~希望可以繼續下去!
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